15 (26) декабря 1749 г. на р. Дон, выше места впадения в неё р. Темерник, у урочища Богатый Колодезь, по указу императрицы Елизаветы Петровны были основаны Темерницкая пограничная таможня и порт.
В 1761 г. началось строительство крепости, названной именем Св. Дмитрия (1651-1709), митрополита Ростовского, причисленного в 1757 г. к лику святых.
В конце 18 в. с присоединением к России Причерноморья крепость потеряла своё стратегическое значение. Поселение при ней в 1797 г. было преобразовано в город. В 1806 г. официально утверждено его название Ростов-на-Дону.
С 1797 г. Ростов-на-Дону - уездный город Новороссийской, с 1802 г. - Екатеринославской губерний.
В 1856 г. в уездном городе Ростов-на-Дону Екатеринославской губернии насчитывалось 10 церквей, 1792 дома, 285 лавок.
С 1887 г в составе Области войска Донского (с 1888 г. окружной центр).
В первой половине 19 в. Ростов-на-Дону - крупный торговый город на юге России. С середины 19 в. город становится также крупным промышленным центром и важным транспортным узлом юга России.
В 1846 г. был построен чугунолитейный завод (ныне судостроительно-судоремонтный завод "Красный Дон"), в 1853 г. - табачная фабрика. В 1859 г. начал действовать машиностроительный завод, изготовлявший паровые шхуны, паровые котлы, насосы, в 1870 г. - бумажная фабрика. В 1896 г. в городе построена электростанция.
В 1870 г. Ростов-на-Дону был соединён железной дорогой с Харьковом, в 1871 г. с Воронежем, в 1875 г. с Владикавказом.
В 1898 г. построен завод сельскохозяйственных машин (ныне - культиваторный завод "Красный Аксай"). К началу 20 в. в Ростове-на-Дону насчитывалось около 140 промышленных предприятий. Ростовский порт по объёму грузооборота (главным образом вывоз зерна, железа, леса) занимал одно из первых мест на юге страны. В период навигации здесь было занято свыше 15 тыс. рабочих.
В 1929 г. в черту Ростова-на-Дону вошёл город Нахичевань-на-Дону (29.3 тыс. жит., 1897), основанный в 1778 г. переселёнными сюда по указу Екатерины II крымскими армянами, с 1783 г. - безуездный город Екатеринославского наместничества.
В годы Гражданской войны власть в Ростове-на-Дону неоднократно менялась, шли ожесточённые бои. В декабре 1917 г. город взяли войска генерала А.М. Каледина. С марта по май 1918 г. Ростов-на-Дону был центром Донской советской республики. В начале мая 1918 г. в город вступили немецкие оккупационные войска, затем войска генерала А.И. Деникина. В январе 1920 г. в Ростов-на-Дону вошли части 1-й Конной армии.
С 1924 г. Ростов-на-Дону - центр Северо-Кавказского, с 1934 г. - Азово-Черноморского краёв, с 1937 г. - Ростовской области.
В 1920-30-х гг. в Ростове-на-Дону реконструированы и расширены старые промышленные предприятия, созданы новые: химический завод (построен в 1924-25), завод "Ростсельмаш" (1926-31) и др. В 1920-е гг. введена в эксплуатацию первая в стране ТЭЦ.
В период Великой Отечественной войны 1941-45 район Ростова-на-Дону и сам город - места ожесточённых сражений, город был оккупирован немецко-фашистскими войсками дважды: с 21 по 29 ноября 1941 г. и с 24 июля 1942 г. по 14 февраля 1943 г. Окончательно освобождён войсками Южного фронта в ходе Ростовской операции.
В 1962 г. в черту города вошла станица Александровская Аксайского района (12.7 тыс. жит., 1959).
